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BCA蛋白定量试剂盒（编号:AR0146)

试剂盒内容

     A液             100ml

     B液              5ml

     蛋白标准品    10mg×5支

测量次数

应用试管法可以测量50管，微孔板法可以测量500孔

基本原理
      碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，吸光度强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

主要特点

1.准确灵敏, 线性范围广，BCA试剂的蛋白质测定范围是20－2000ug/ml。
2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
3.经济实用：在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。
4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。

保存条件

BCA试剂 A, B 室温保存，蛋白标准品-20℃保存，本试剂盒自订购之日起一年内有效。

使用说明

试管法

1.配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积 BCA试剂B（50:1）配制适量BCA工作液，充分混匀。

2.稀释标准品：先将冻干标准品用0.9%NaCl或PBS稀释成2000ul/ml的储存液，然后储存液稀释至25～2000ug/ml。

管号
 稀释液体积
 标准品体积
 终浓度
 
A
 0ul
 600ul
 2000ug/ml
 
B
 100ul
 300ul
 1500ug/ml
 
C
 300ul
 300ul(从A管取)
 1000ug/ml
 
D
 200ul
 200ul(从B管取)
 750ug/ml
 
E
 300ul
 300ul(从C管取)
 500ug/ml
 
F
 300ul
 300ul(从E管取)
 250ug/ml
 
G
 300ul
 300ul(从F管取)
 125ug/ml
 
H
 400ul
 100ul(从G管取)
 25ug/ml
 
I
 300ul
 0ul
 0ug/ml（空白）
 

3.将0.1ml的标准品和样本分别添加于测试管中。

4.各管加入2ml BCA工作液，37℃放置30分钟。（增加孵育时间和温度能够增加

562nm的吸光度值和检测最低浓度，降低测量范围）

5.冷却到室温，（BCA不会达到真正的反应终止点，当冷却到室温时颜色依然会

产生。但是在室温下颜色产生的效率非常低，在冷却后10分钟内测量完所有

试管则无影响）用酶标仪测定A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。

微孔板法

1.      配制工作液（同上）

2.      稀释标准品（同上）

3.      将25ul的标准品和合适浓度范围的样本分别添加于96孔板的微孔中。

4.      各孔加入200ul BCA工作液，充分混匀。

5.      盖上96孔板盖，37℃孵育30分钟。

6.      冷却到室温，用酶标仪测定A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项
1.在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37℃温育使溶解, 如发现细菌

污染则应丢弃。
2.样品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类会影响检测结果，请试用Bradford

蛋白浓度测定试剂盒；高浓度的去垢剂也影响实验结果，可用TCA沉淀去除干

扰物质。
3.要得到更为精确的蛋白浓度结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔且标准品与

样品处理要尽量一样（如采用同样的溶液溶解样品和标准品）, 每次均应做标

准曲线。
4.当试剂A和B混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失。
5.需准备37℃水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-595nm

之间，562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定

蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应注意

防止因水分蒸发影响检测结果。

问题：

该产品价格是多少 — gao

答案：

160元一盒

问题：

该产品价格是多少 — gaohaiy

答案：

BCA蛋白定量试剂盒是260元一盒